Miseq操作流程及报价须知.docx

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Miseq开刀流畅及报价须知.docx

文档绍介:
一、确立或使安全藏书最复杂的办法
Illumina为研究者预备了确立或使安全藏书最复杂的办法,运用Illumina NEXTRA转停滞技术,D***段可以在试管中完成或结束,摈除身体检查切力或酶割切步调。,完成或结束D***段的一步,端部规格与触点台阶,全部的迅速移动只需90分钟。,人工控制开刀不超越20分钟,启动DNA只必要50ng。一体集成的海拔自动化零碎,点击触屏开端排序MISEQ预备最复杂的新GE。经过眼睛的的触屏连接获得复杂的法律文件开刀,具有RFID尾随的即插即用药剂,自动化的悠闲地性。精巧、集成MISEQ平台集成聚居人群发展,边和边排序与充分记载剖析,不必要否则辅佐安装。人工控制开刀全部的聚居人群的发展和定序迅速移动。确认的记载技能是鉴于Illumina的已使发誓慢慢向前移动分解慢慢向前移动。,经过ReviBL大规模成对定序数以百万计的破裂,当奇特的事物碱基被添加到DNA链时检测它们。鉴于每个检测电流说得中肯四衣服、材料等可翻转的保险装置器说得中肯每一体都是CO。,所以,理当竞赛最小量了歪斜。,与否则技术比拟,非常使萧条了原始变字率。。终极出现海拔精确的每个碱基的定序通知,哪怕反复序列和均聚物确保了可信赖的碱基检测。。
藏书扩大:剪切力,加触点
二、一体集成的海拔自动化零碎,点击触屏可以举行排序。
Miseq 预备最复杂的新生代定序迅速移动。经过眼睛的的触屏连接获得复杂的法律文件开刀,即插
运用药剂。 RFID 追踪,自动化的悠闲地性。精巧、使一致的 Miseq 平台集成聚居人群发展,边和边排序与充分记载剖析,不必要否则辅佐安装。全部的聚类发展和定序迅速移动不超越人工控制 20 分钟。
三、确认记载技能
以 Illumina 鉴于考验边分解慢慢向前移动排序技术,经过ReviBL大规模成对定序数以百万计的破裂,在奇特的事物碱基掺入增长DNA 链时检测它们。鉴于每个检测环中四种衣服、材料等可翻转的保险装置子嫁的dNTP 都在,所以,理当竞赛最小量了歪斜。,与否则技术比拟,非常使萧条了原始变字率。。终极出现海拔精确的每个碱基的定序通知,哪怕反复序列和均聚物确保了可信赖的碱基检测。。
因为卓越的定序一定尺寸的、卓越的定序范本量的姣姣者定序预调构成
高通量定序上菜用具
二盐基的定序上菜用具
hiseq
放大率子定序
sanger定序
因为卓越的定序一定尺寸的、卓越的定序范本量的姣姣者定序预调构成
1. 本着因为奇特的事物范本所需检测的孟德尔基因仔细研究分三档
a. 定序仔细研究<= 100Kb,推荐用Sanger法定序
b. 500Kb <= 定序仔细研究< 100Kb,推荐用放大率子法定序
c. 200Kb < 定序仔细研究<= 100Mb,推荐用目标区域夺得定序
2. 本着下面的分法,经济的构成
a. Sanger法定序,适用仔细研究:序列一定尺寸的<= 100Kb
i. 全体与会者Sanger法排序,
1. 每500 bp的一对来回地测,每个序列为20元(PCR) + Sanger定序。
2. 每个战利品的定序本钱:100000/500 * 20 = 4000元/范本。
3. 记载剖析,500元/范本
4. 添加多大约手册,每个战利品的总本钱是4500元。。有利于的选择。
二。 高通量定序,2000元/范本,1000~3000元/重定序战利品,生物通知剖析免费必需有两代,本钱无优势。这边高通量定序的鳎优势,在试管中完成或结束PCR是能够的。,缩减初始战利品的量(DNA)
b. 放大率子+ 二盐基的定序,适用仔细研究:500 kb <= 定序仔细研究一定尺寸的< 100Kb
i. 放大率子(放大率子)办法的定序
1. 以200Kb,100范本为例
2. 启蒙读本与PCR,多重的PCR启蒙读本的设计,每回放大率的一定尺寸的约为150 bp。,合计120000元,每个战利品市场占有率,1200元
3. PCR答复,本钱 20元/范本
4. 建库,2000元/范本
5. 定序,
a. Miseq平台,5G记载/运转,26500元/润
b. 条件每回运转一次,测24个战利品,每个范本的定序分得的财产的本钱:26500/24=1104元/范本
c. 条件一次运转超越24个战利品,定序本钱可以额外的市场占有率
6. 记载剖析, 500元/范本
7. 总本钱: 1200 + 20 + 2000 + 1104 + 500 = 4824元
二。 记载避难所吃水
1. Miseq平台,
a. PE 2*250 定序状况
b. 总共5G记载/Flowcell,
c. 分为24个范本。,至多96个战利品
d. 被测仔细研究, 200Kb
e. 避难所吃水,5,000,000,000/24/200,000 = 1041次避难所;条件是96个范本,5,000,000,000/96/200,000 = 260倍
2. PGM平台
a. 314圣饼(316/318和否则圣饼也可以运用),仅通量差,技能无差异。
b. 分为4个范本。
c. 每个314圣饼的输入为0.1g。
d. 测仔细研究200 KB
e. 避难所吃水,100,000,000/4/200,000=125倍
i二。 放大率定序是100kb~500 kb定序说得中肯次要选择
IV。 Sanger定序,200000 / 500 * 2 *30=24000,本钱过高,不实际的
v. 用夺得定序,约5000~6000元,较贵,且开刀复杂,剖析同样复杂的,
vi. 放大率子定序的限度局限以代理商的身份行事:AM前必要多重的PCR,到眼前为止,多重的PCR放大率效力的无变化一直是。更多放大率子,不一致的性越高。这是运用大于500 kb的仔细研究举行排序的。,很
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